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TCA蛋白浓缩试剂盒
 九号彩票货号: RTD9101
 九号彩票名称: TCA蛋白浓缩试剂盒
 九号彩票价格/规格: 50次 500元
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 更新时间: 2018-04-09
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  • TCA蛋白浓缩试剂盒(目录号:RTD9101


    试剂盒内容及保存:TCA Protein Precipitation Kit

    货号

    九号彩票名称

    包装

    贮存

    RTD9101-01

    试剂A

    3 ml

    RT

    RTD9101-02

    试剂B

    30 ml

    RT

    RTD9101-03

    溶解液C

    1 ml

    -20℃

    RTD9101-04

    中和液D

    250 μl

    RT

     

    说明书

    1

     

    储存条件和效期:

    试剂盒常温运输;收到后,按照标签温度贮存;本试剂盒有效期2年。

    九号彩票简介:

    试剂盒原理:在酸性条件下,三氯乙酸(Trichloroacetic acid,TCA)与蛋白质形成不溶性盐,使蛋白质变性导致构象发生改变,蛋白暴露出较多的疏水性基团,蛋白发生聚集而沉淀。为了避免TCA对后续电泳的影响,沉淀的蛋白要使用洗涤液彻底清洗去除TCA。浓缩后的蛋白可以用于SDS-PAGE和Western blot 前的蛋白样品处理。

    以每次浓缩200 μl蛋白样品计算,本试剂盒可以使用50次。

    操作方法:

    1.  准备1.5 ml干净的离心管,加入200 μl蛋白样品溶液。

    2.  加入50 μl试剂A,涡旋震荡10-30秒,使之充分混匀。

    3.  冰浴或4℃放置30-60分钟。

    4. 4℃,12000 rpm(13000 g)离心10 分钟。

    5.  小心去掉上清液,保留沉淀。

    注:沉淀可能不可见,请小心操作;可以用200μl移液器彻底吸弃上清。

    6.  沉淀中加入600 μl试剂B,涡旋震荡10-30秒。

       注:试剂B有刺激性气味,请在通风橱内操作。

    7.  冰浴或4℃放置10 分钟,4℃,12000 rpm(13000 g) 离心10分钟;在通风橱中,倒掉上清。

    8.  重复步骤6,步骤7一次。残留上清用20 μl吸头彻底吸弃,沉淀物通风晾干30-60秒。

    注:沉淀不能过分干燥,否则不好溶解。

    9.  加入20 μl溶解液C,混匀,彻底溶解沉淀,溶液正常颜色应为蓝色;如果溶液为淡绿色或黄色,加入1-5 μl中和液D,使颜色变回蓝色。

    10. 95℃处理5分钟,电泳上样进行SDS-PAGE 电泳相对定量和分子量分析。



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