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考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)
 九号彩票货号: RTD6205
 九号彩票名称: 考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)
 九号彩票价格/规格: 50次 150元
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 更新时间: 2018-03-29
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    九号彩票编号

    规格

    贮存

    RTD6205

    50

    常温

    九号彩票组成:

    九号彩票编号

    名称

    规格

    贮存

    RTD6203

    考马斯亮蓝染色液

    250 ml

    常温

    RTD6204

    考马斯亮蓝脱色液

    500 ml

    常温

    储存条件

    常温保存,开封后一年有效。

    九号彩票简介

    考马斯亮蓝染色试剂盒是以考马斯亮蓝G-250为主要成分,采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的染色和脱色。采用常规染色方法需至少1小时可以完成染色;采用快速染色方法数分钟即可完成染色。本染色液经过改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性气味的乙酸。

    使用说明:

    常规染色脱色方法

    1.  电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,确保染色液可以充分覆盖凝胶。

    2.  置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色1小时或更长时间。

        注:具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚,温度较低,则染色时间宜适当延长。凝胶较薄,温度较高,则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近,在染色液中几乎看不清凝胶时,可以认为已染色充分。染色2-4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。

    3.  倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。

    4.  加入适量脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。

        注:脱色液可以使用考马斯亮蓝脱色液(RTD6204);如果希望自行配制,推荐的脱色液配方为:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸馏水。

    5.  置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次,直至蓝色背景基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。

    注:脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,可以使部分染料吸附在吸水纸上,加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。

    6. 完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

    快速染色脱色方法

    1.  电泳结束后,取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。通常对于胶浓度大于10%的胶比较坚韧,在发生煮沸时不易破损;对于胶浓度小于10%的胶,宜尽量避免煮沸,以免出现胶碎裂的情况。

    2.  随后在染色液温度较高的情况下,在室温摇床上摇动5-10分钟。

    3.  倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。

    4.  加入适量脱色液,确保染色液可以充分覆盖凝胶。

       注:脱色液可以使用考马斯亮蓝染色脱色液(RTD6204);如果希望自行配制,推荐的脱色液配方为:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸馏水。

    5.  微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。

    6.  随后在脱色液温度较高的情况下,在摇床上摇动5-10分钟。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白条带。

    7.  更换新鲜的脱色液,重复步骤5和步骤6,直至蓝色背景基本上全部被脱去,蛋白条带染色效果达到预期。

    8.  完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。  


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